NFkB(p65)过度表达稳定细胞系

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 NFkB(p65)过度表达稳定细胞系  
NFkB由Rel家族中的NFkB1(p50),NFkB2(p52),RelA(p65),RelB,和c-Rel(Rel)5个同质和异质二聚体组成。主要的RelA(p65)/p50二聚体游离于未受IKBs刺激的细胞质基质中。信号感应导致IkB离解和降解,并使NFkB复合体激活。被激活的NFkB复合体转移到细胞核,结合在DNAkB结合基序,然后启动目标基因转录。NFKB在许多生物过程发挥了重要作用,如分化、增殖和凋亡。NFkB的功能障碍可引起许多疾病,如炎症和癌症。Signosis的NFkB(P65)过表达稳定COS-7细胞系,可有效地用于研究NFkB通路。  
A.优点:  
持续稳定——野生型p65蛋白在细胞中稳定表达,避免试验差异;  
节省时间——细胞系可即用于研究p65信号通路;  
B.原理:  
细胞系通过NFkB(p65)CMVmyc标签表达载体转染建立。该表达载体带潮霉素筛选标记,用潮霉素筛选,潮霉素的抗性克隆再用NFkB(p65)和myc标签表达筛选,选择有高表达的克隆,增殖成为细胞系。  
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