一、样品RNA的制备
、用自选方法抽提病毒样品RNA。注意:可以选用本公司生产的一管式病毒RNAout
2、或柱式病毒RNAout。
二:RT(逆转录)反应合成cDNA
.按下表配制RT反应体系(20μL体系)
2.70℃保温5分钟变性模板后立即冰浴。
3.严格按顺序加入6μLRTBuffer(含dNTP)和2μLMMLV逆转录酶(含RI),
反应终体积为20μL。
4.42℃保温60分钟。此步为RT反应。
5.70℃保温0分钟以终止反应,然后放置在冰上待用。合成的cDNA可以直接作为PCR模板使用,丌需要纯化。
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4.有效期为6个月
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